Una investigación desarrollada en colaboración entre el Instituto Oswaldo Cruz (IOC/Fiocruz) y la Universidad de Texas en El Paso (UTEP), en Estados Unidos, pueden contribuir a mejorar el diagnóstico de la enfermedad de Chagas.
Causada por el parásito Trypanosoma cruziLa infección generalmente es asintomática y puede provocar complicaciones graves en algunos pacientes.
El método validado por los científicos facilita la extracción de ADN de T. cruzi en muestras de sangre. Este paso es un requisito previo para el diagnóstico molecular, que detecta el genoma del parásito.
Investigadores validaron el uso de un robot para extraer ADN de Trypanosoma cruzi de muestras de sangre de pacientes. Foto: Gutemberg Brito
Utilizando un robot para la extracción de ADN, los investigadores obtuvieron resultados más rápidos, más sensibles y más confiables en comparación con el procedimiento utilizado actualmente, con kits de columnas de sílice.
Los resultados fueron publicados en la revista científica Revista Internacional de Ciencias Moleculares.
“El uso del robot facilita enormemente la extracción de ADN, es más rápida y reduce el riesgo de contaminación de la muestra. En las pruebas, observamos una mayor capacidad de recuperación y una mayor pureza del ADN extraído con esta metodología, lo que proporcionó una mayor sensibilidad para detectar cargas parasitarias extremadamente bajas”, destaca el director del Laboratorio de Virología y Parasitología Molecular do IOC, Otacilio Moreira, quien coordinó la investigación junto con Igor Almeida y Priscila Farani, de la Utep.
Para extraer ADN de una muestra, el robot de extracción utiliza microesferas magnéticas, que atraen este tipo de moléculas. En la columna de extracción, el ADN se une a las moléculas de sílice, separándolo de los demás componentes de la muestra.
Además de esta diferencia en la forma de atraer el ADN, el robot automatiza el procedimiento de extracción, eliminando la necesidad de una serie de pasos que deben ser realizados manualmente por profesionales que utilizan la técnica de la columna de sílice.
Otacilio Moreira y Amanda Faier-Pereira destacan la importancia de mejorar el diagnóstico de la enfermedad de Chagas. Foto: Gutemberg Brito
El equipo ya se utiliza de forma rutinaria en el diagnóstico de diversas enfermedades. Sin embargo, la metodología aún no había sido validada para la enfermedad de Chagas, en muestras de sangre conservadas en solución de guanidina-EDTA.
El estudio incluyó dos etapas de análisis. En el primero, realizado en la Utep, los investigadores compararon el desempeño de las dos metodologías en condiciones controladas, utilizando muestras de sangre contaminadas artificialmente en el laboratorio con cantidades cada vez menores de ADN parásito.
En muestras con baja carga parasitaria, conteniendo material genético equivalente a menos de 1 parásito por ml, la técnica de extracción automatizada mostró un mejor desempeño.
En la segunda etapa de análisis se validó la metodología para el diagnóstico en muestras de sangre de pacientes con enfermedad de Chagas crónica. Estas pruebas se realizaron en el IOC, de la doctoranda del Programa de Postgrado en Biología Parasitaria, Amanda Faier-Pereira, con muestras proporcionadas por el Instituto Nacional de Infectología Evandro Chagas (INI/FiocRuz). Los análisis mostraron un 100% de concordancia en los resultados entre las dos metodologías.
“En conjunto, estas pruebas validan el uso del robot de extracción para el diagnóstico molecular de la enfermedad de Chagas e indican que, con cargas parasitarias extremadamente bajas, esta metodología debería ser superior a la columna de sílice”, afirma Otacilio.
Robot automatiza la extracción de ADN de las muestras, simplificando el procedimiento y ofreciendo mayor sensibilidad en el diagnóstico molecular. Foto: Gutemberg Brito
La validación del procedimiento es otra contribución del IOC sobre el tema, considerando la posibilidad de incorporar el diagnóstico molecular de la enfermedad de Chagas al Sistema Único de Salud (SUS).
En 2022, la Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria (Anvisa) otorgó el registro de la Kit NAT de Chagas, que reúne todos los compuestos necesarios para realizar la prueba PCR para detectar la T. cruzi. La herramienta fue desarrollada en colaboración entre IOC y el Instituto de Biología Molecular de Paraná (IBMP).
La extracción automatizada de ADN es una herramienta complementaria que facilita y mejora el procesamiento de las muestras para realizar pruebas con el kit.
La incorporación de herramientas al SUS depende de la evaluación de la Comisión Nacional para la Incorporación de Tecnologías al Sistema Único de Salud (Conitec) y de la decisión final del Ministerio de Salud.
Dos estudios en curso buscan evaluar, en la práctica, los beneficios de las pruebas moleculares para aumentar la detección de casos agudos de enfermedad de Chagas.
El estudio de Diagnóstico Oral de Chagas (DiaChO), dirigido por IOC, se centra en las infecciones causadas por la ingestión de alimentos contaminados por T. cruzi (como el açaí, la bacaba y el jugo de caña de azúcar). Actualmente, esta es la forma más común de transmisión de la enfermedad de Chagas en Brasil.
Desarrollada en los estados de Pará, Amapá y Amazonas, la investigación cuenta con la colaboración de las Secretarías Estaduales de Salud y financiación del Programa Inova F.iocRuz.
El estudio Cuida Chagas, liderado por el INI, con la participación de IOC, ataca la infección en los recién nacidos, quienes pueden contraer el parásito durante el embarazo o el parto, cuando la madre está infectada con T. cruzi.
Realizado en Brasil, Bolivia, Colombia y Paraguay, el estudio está financiado por Unitaid y el Ministerio de Salud.
“Actualmente, el diagnóstico de estos casos se realiza mediante un examen parasitológico, que consiste en observar el parásito en la muestra de sangre con un microscopio. El diagnóstico molecular es un método más sensible, capaz de detectar fragmentos del parásito, lo que puede ampliar el diagnóstico. Esto es esencial para promover el acceso al tratamiento y prevenir infecciones crónicas, que pueden tener consecuencias graves”, refuerza Otacilio, quien coordina el estudio 'DiaChO' y forma parte del proyecto 'Cuida Chagas'.
Según el Ministerio de Salud, en 516 se registraron en Brasil 2023 casos de enfermedad de Chagas aguda y las estimaciones indican que entre 1,9 y 4,6 millones de personas son portadoras crónicas de la enfermedad. T. cruzi en el pais.
Debido al ciclo natural de la enfermedad, muchos portadores nunca desarrollan síntomas. Sin embargo, hasta un 40% termina presentando complicaciones, como problemas cardíacos y digestivos, que se desarrollan después de años de infección silenciosa.
El tratamiento de la infección en la fase aguda es más eficaz para eliminar la T. cruzi, previniendo lesiones crónicas.
*Artículo: Farani, PSG, López, J., Faier-Pereira, A., Hasslocher-Moreno, AM, Almeida, IC, Moreira, OC (2025). Utilidad de la extracción automatizada de ADN basada en perlas magnéticas para mejorar el diagnóstico molecular de la enfermedad de Chagas. Revista Internacional de Ciencias Moleculares, 26(3), 937. https://doi.org/10.3390/ijms26030937
Una investigación desarrollada en colaboración entre el Instituto Oswaldo Cruz (IOC/Fiocruz) y la Universidad de Texas en El Paso (UTEP), en Estados Unidos, pueden contribuir a mejorar el diagnóstico de la enfermedad de Chagas.
Causada por el parásito Trypanosoma cruziLa infección generalmente es asintomática y puede provocar complicaciones graves en algunos pacientes.
El método validado por los científicos facilita la extracción de ADN de T. cruzi en muestras de sangre. Este paso es un requisito previo para el diagnóstico molecular, que detecta el genoma del parásito.
Investigadores validaron el uso de un robot para extraer ADN de Trypanosoma cruzi de muestras de sangre de pacientes. Foto: Gutemberg Brito
Utilizando un robot para la extracción de ADN, los investigadores obtuvieron resultados más rápidos, más sensibles y más confiables en comparación con el procedimiento utilizado actualmente, con kits de columnas de sílice.
Los resultados fueron publicados en la revista científica Revista Internacional de Ciencias Moleculares.
“El uso del robot facilita enormemente la extracción de ADN, es más rápida y reduce el riesgo de contaminación de la muestra. En las pruebas, observamos una mayor capacidad de recuperación y una mayor pureza del ADN extraído con esta metodología, lo que proporcionó una mayor sensibilidad para detectar cargas parasitarias extremadamente bajas”, destaca el director del Laboratorio de Virología y Parasitología Molecular do IOC, Otacilio Moreira, quien coordinó la investigación junto con Igor Almeida y Priscila Farani, de la Utep.
Para extraer ADN de una muestra, el robot de extracción utiliza microesferas magnéticas, que atraen este tipo de moléculas. En la columna de extracción, el ADN se une a las moléculas de sílice, separándolo de los demás componentes de la muestra.
Además de esta diferencia en la forma de atraer el ADN, el robot automatiza el procedimiento de extracción, eliminando la necesidad de una serie de pasos que deben ser realizados manualmente por profesionales que utilizan la técnica de la columna de sílice.
Otacilio Moreira y Amanda Faier-Pereira destacan la importancia de mejorar el diagnóstico de la enfermedad de Chagas. Foto: Gutemberg Brito
El equipo ya se utiliza de forma rutinaria en el diagnóstico de diversas enfermedades. Sin embargo, la metodología aún no había sido validada para la enfermedad de Chagas, en muestras de sangre conservadas en solución de guanidina-EDTA.
El estudio incluyó dos etapas de análisis. En el primero, realizado en la Utep, los investigadores compararon el desempeño de las dos metodologías en condiciones controladas, utilizando muestras de sangre contaminadas artificialmente en el laboratorio con cantidades cada vez menores de ADN parásito.
En muestras con baja carga parasitaria, conteniendo material genético equivalente a menos de 1 parásito por ml, la técnica de extracción automatizada mostró un mejor desempeño.
En la segunda etapa de análisis se validó la metodología para el diagnóstico en muestras de sangre de pacientes con enfermedad de Chagas crónica. Estas pruebas se realizaron en el IOC, de la doctoranda del Programa de Postgrado en Biología Parasitaria, Amanda Faier-Pereira, con muestras proporcionadas por el Instituto Nacional de Infectología Evandro Chagas (INI/FiocRuz). Los análisis mostraron un 100% de concordancia en los resultados entre las dos metodologías.
“En conjunto, estas pruebas validan el uso del robot de extracción para el diagnóstico molecular de la enfermedad de Chagas e indican que, con cargas parasitarias extremadamente bajas, esta metodología debería ser superior a la columna de sílice”, afirma Otacilio.
Robot automatiza la extracción de ADN de las muestras, simplificando el procedimiento y ofreciendo mayor sensibilidad en el diagnóstico molecular. Foto: Gutemberg Brito
La validación del procedimiento es otra contribución del IOC sobre el tema, considerando la posibilidad de incorporar el diagnóstico molecular de la enfermedad de Chagas al Sistema Único de Salud (SUS).
En 2022, la Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria (Anvisa) otorgó el registro de la Kit NAT de Chagas, que reúne todos los compuestos necesarios para realizar la prueba PCR para detectar la T. cruzi. La herramienta fue desarrollada en colaboración entre IOC y el Instituto de Biología Molecular de Paraná (IBMP).
La extracción automatizada de ADN es una herramienta complementaria que facilita y mejora el procesamiento de las muestras para realizar pruebas con el kit.
La incorporación de herramientas al SUS depende de la evaluación de la Comisión Nacional para la Incorporación de Tecnologías al Sistema Único de Salud (Conitec) y de la decisión final del Ministerio de Salud.
Dos estudios en curso buscan evaluar, en la práctica, los beneficios de las pruebas moleculares para aumentar la detección de casos agudos de enfermedad de Chagas.
El estudio de Diagnóstico Oral de Chagas (DiaChO), dirigido por IOC, se centra en las infecciones causadas por la ingestión de alimentos contaminados por T. cruzi (como el açaí, la bacaba y el jugo de caña de azúcar). Actualmente, esta es la forma más común de transmisión de la enfermedad de Chagas en Brasil.
Desarrollada en los estados de Pará, Amapá y Amazonas, la investigación cuenta con la colaboración de las Secretarías Estaduales de Salud y financiación del Programa Inova F.iocRuz.
El estudio Cuida Chagas, liderado por el INI, con la participación de IOC, ataca la infección en los recién nacidos, quienes pueden contraer el parásito durante el embarazo o el parto, cuando la madre está infectada con T. cruzi.
Realizado en Brasil, Bolivia, Colombia y Paraguay, el estudio está financiado por Unitaid y el Ministerio de Salud.
“Actualmente, el diagnóstico de estos casos se realiza mediante un examen parasitológico, que consiste en observar el parásito en la muestra de sangre con un microscopio. El diagnóstico molecular es un método más sensible, capaz de detectar fragmentos del parásito, lo que puede ampliar el diagnóstico. Esto es esencial para promover el acceso al tratamiento y prevenir infecciones crónicas, que pueden tener consecuencias graves”, refuerza Otacilio, quien coordina el estudio 'DiaChO' y forma parte del proyecto 'Cuida Chagas'.
Según el Ministerio de Salud, en 516 se registraron en Brasil 2023 casos de enfermedad de Chagas aguda y las estimaciones indican que entre 1,9 y 4,6 millones de personas son portadoras crónicas de la enfermedad. T. cruzi en el pais.
Debido al ciclo natural de la enfermedad, muchos portadores nunca desarrollan síntomas. Sin embargo, hasta un 40% termina presentando complicaciones, como problemas cardíacos y digestivos, que se desarrollan después de años de infección silenciosa.
El tratamiento de la infección en la fase aguda es más eficaz para eliminar la T. cruzi, previniendo lesiones crónicas.
*Artículo: Farani, PSG, López, J., Faier-Pereira, A., Hasslocher-Moreno, AM, Almeida, IC, Moreira, OC (2025). Utilidad de la extracción automatizada de ADN basada en perlas magnéticas para mejorar el diagnóstico molecular de la enfermedad de Chagas. Revista Internacional de Ciencias Moleculares, 26(3), 937. https://doi.org/10.3390/ijms26030937
Se permite la reproducción del texto sin fines de lucro siempre que se cite la fuente (Comunicação / Instituto Oswaldo Cruz)
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